Primer Premier 5.0软件的主要功能分四种,即引物设计、限制性内切酶位点分析、DNA 基元(motif)查找和同源性分析功能,破解版64位功能更加的强大,使用起来也很方便,闪电下载吧亲测,欢迎下载!
安装破解教程
1、在本站下载并解压,得到Primer Premier 5安装包和注册机.exe
2、在Primer Premier 5安装包中找到Primer Premier 5.exe运行,本次小编带来的是便携版,无需安装,可直接使用,
3、如图所示,点击Active Product按钮
4、如图所示,得到机器码Machine ID
5、运行注册机,将Machine ID对应输入到注册机中,点击Generate生成激活码
6、将激活码复制到软件窗口中,点击ok
7、激活成功
使用帮助
1、新建
打开Primer5,依次点击“file”——“new”——“DNASequence”,新建操作界面。
2、输入模板基因
复制基因模板后,使用键盘快捷键“Ctrl+V”将下载的引物模板粘贴到空白框内,然后选择“Asis”,点击“OK”。
3、SearchPrimer
找到界面左上角“Function”——“Primer”,在新跳出的界面上点击“Search”,需要设置相应的条件,才能开始搜索。
4、条件设置
点击“Search”后,又跳出一个界面,我们从上到下依次设置:“SearchFor”选择“PCRPrimers”;“SearchType”选择“Pairs”;“SearchRanges”要根据不同的情况而定,一般来说选择基因全长,如“1”——“1683”;“PCRProductSize”一般鉴定选择300-500,测序选择1200-1600,不能超过基因全长;“PrimerLength”一般为20+(-)2。
5、点击两次“OK”
条件设置完毕后,点击“OK”,跳出新的界面后再点击“OK”,最后跳出软件为你选择的按照合成率从高到底的全部引物序列。
6、引物选择
将引物表与左侧表格结合起来进行引物的选择。从小编设计的引物表中看到,最高合成率为88,其对应的左侧表中均出现“Dimer”和“CrossDimer”,说明此引物不甚理想。最佳的情况为“Hairpin”、“Dimer”、“FalsePriming”和“CrossDimer”都不出现,也就是100合成率。
7、重新设置条件
如何引物不甚理想,那么就需要重新设置引物的各个条件,尤其是“SearchRanges”的选择,需要我们再次点击“Search”,跳出条件设置界面后重新设置。
8、选择理想引物
经过多次的不断更改和设置后,最终选出较为理想的一对引物,合成率最好在98以上,四种状况均不出现为好。
更新日志
1、种间交叉引物设计
利用来自多个物种的序列设计扩增引物
2、病理检测引物设计
可以用在高保区域设计引物
3、等位基因特效引物
设计专用于扩增某一类相关序列中特定成员的引物